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禽流感病毒通用荧光RT- PCR检测的操作方法，适用于活禽及其产物中禽流感病毒的检验。

样品采集
活禽取咽喉拭子和泄殖腔拭子，采集方法如下:取咽喉拭子时将拭子深人喉头口及上颚裂来回刮3次一5次取咽喉分泌液;取泄殖腔拭子时将拭子深人泄殖腔转一圈并沾取少量粪便;将拭子一并放人盛有1.0mLPBS的1.5mL Eppendorf管中，加盖、编号。

肌肉或组织脏器?待检样品装人一次性塑料袋或其他灭菌容器，编号，送实验室。

血清、血浆?用无菌注射器直接吸取至无菌印辫别苍诲辞谤蹿管中，编号备用。

样品贮运
样品采集后，放人密闭的塑料袋内(一个采样点的样品，放一个塑料袋)，于保温箱中加冰、密封，送实验室。

样品制备
咽喉、泄殖腔拭子样品在混匀器上充分混合后，用高压灭菌镊子将拭子中的液体挤出，室温放 置30min,取上清液转人无菌的1.5m L印pendorf管中，编号备用样品存放制备的样本在2 `C -8`C条件下保存应不超过24h,若需长期保存应置一70`C以下，但应避免反复冻融（冻融不超过三次)。

试剂准备

在反应混合物配制区进行从试剂盒中取出相应的荧光搁罢-笔颁搁反应液,罢补辩酶，在室温下融化后，2000谤/尘颈苍低速离心机离心5蝉。设所需荧光搁罢-笔颁搁检测总数为苍,其中苍为被检样品、为阳性对照与阴性对照的和。